ELISA試劑盒為什么會變質(zhì)？

更新時間：2025-06-11

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一、辦法學(xué)的影響

ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時差所引起的競爭等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。

二、試劑要素

不同批次的ELISA試劑在制作進程中很難保證質(zhì)量一致，即使是通過批批檢的項目其檢測成果也存在差異，因而必須挑選和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號改動而從頭建立質(zhì)控體系及從頭評估試劑的雜亂進程，并且能夠保證成果的穩(wěn)定性；關(guān)于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，防止重復(fù)凍融造成試劑的失效。

三、樣本要素

標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素，前者包含類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、本身抗體、溶菌酶等，后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細菌污染、標(biāo)本貯存時刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。

四、操作要素

ELISA操作步驟雜亂，操作不當(dāng)將引起較大的差錯。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。

五、灰區(qū)的設(shè)置

通常情況下，ELISA定性試驗以“陽性"和“陰性"來報告成果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值"(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定成果報告的根據(jù)。

六、標(biāo)本復(fù)查

ELISA手工檢測進程雜亂，影響要素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也或許因孔間差異而造成成果的差異，因而加大復(fù)查力度是保證成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進行復(fù)查。

七、常表明成果的常用辦法

a.定性測定

b.半定量測定成果一般以滴度表明。

c.定量測定即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進行ELISA測定，制作規(guī)范曲線，成果以肯定量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。

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